服务概述Service Overview
利用带有标签的已知蛋白作为诱饵蛋白（最常用的是GST标签，即谷胱甘肽巯基转移酶，glutathione S-transferase），诱饵蛋白特异性结合谷胱甘肽亲和树脂，当目的蛋白溶液过柱时，将诱饵蛋白及其相互作用的蛋白复合物捕获。复合物洗脱后，通过蛋白凝胶电泳分析两种蛋白间的相互作用，或者筛选相应的目的蛋白。
服务优势Our Strengths
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- 特异性结合
- 通过将目标蛋白质与GST融合，实现特异性结合目标蛋白质，筛选和鉴定相互作用伙伴
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- 高通量性
- 可同时研究多个蛋白质相互作用，提高研究效率
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- 简便灵活
- 操作简单，可根据需要调整实验条件
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- 直接检测
- 无需额外标记或修饰，直接检测蛋白质相互作用
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- 可定量性
- 通过定量分析结合事件，提供亲和性和强度信息
服务流程Service Process
1
接收订单及样品
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2
诱饵蛋白与猎物蛋白原核表达载体的构建
→
3
诱饵蛋白与猎物蛋白的诱导表达
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4
诱饵蛋白与猎物蛋白的纯化
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5
Pull-down技术蛋白互作分析
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6
WB进一步鉴定互作蛋白表达
客户提供Sample Requirements
构建表达纯化靶蛋白与相关诱饵蛋白，（点对点验证）纯化蛋⽩诱饵不少于0.5mg，猎物不少于1mg，（NTA或TE溶，不含变性剂）保证蛋⽩活性，注明浓度、标签及⼤⼩。
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01
- 细胞
- 3x10^7个细胞，离心后收集细胞沉淀，沉淀体积约为80-100μL，干冰运输
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02
- 动物组织
- 不少于0.5g，新鲜取材，⼲冰寄送
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03
- 植物组织
- 不少于1g，新鲜幼嫩组织，⼲冰寄送
最终交付Deliverables
• 提供完整的实验报告， SDS-PAGE 以及WB结果
服务说明Service Content
| 服务名称 | 服务内容 | 交付内容及标准 | 服务周期(工作日) |
| GST pull-down-WB | pull down前检测 | WB检测1个诱饵和1个猎物蛋白 | 16 |
| SDS-PAGE考染 | 考染检测1个诱饵和1个猎物蛋白 | ||
| pull down富集 | 对照组和实验组各富集一次 | ||
| pull down后检测 | WB检测1个诱饵和1个猎物的实验后对照组、实验组、input组 | ||
| GST pull-down-MS | pulldown前检测 | WB检测1个诱饵蛋白 | 31 |
| SDS-PAGE考染 | 考染检测1个诱饵蛋白 | ||
| pulldown富集 | 对照组和实验组各富集一次 | ||
| pulldown后检测 | WB检测1个诱饵的实验后对照组、实验组、input组 | ||
| 质谱鉴定 | 含银染及2组（实验组和对照组）质谱鉴定分析 |
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