服务概述Service Overview
数字PCR(Digital Polymerase Chain Reaction,dPCR)是继传统PCR、实时荧光定量PCR(qPCR)后的第三代核酸扩增检测技术。该技术通过将单一PCR反应体系分散为数万个独立的微反应单元,实现核酸模板的单分子扩增,扩增结束后通过阳性微反应单元计数,结合泊松分布算法精准计算样本核酸拷贝数。与传统qPCR技术,数字PCR检测具备多项核心优势:
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绝对定量,无需标准曲线:摒弃传统定量依赖标准曲线的检测模式,通过单分子扩增与阳性微滴计数直接计算核酸原始拷贝数,杜绝标准曲线误差,定量结果更精准、更贴合样本真实浓度。
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超高灵敏度,检出下限极低:可精准检测单拷贝级别的核酸模板,有效识别样本中低丰度突变、微量残留核酸、低浓度病毒模板,针对稀有突变、微量病原体检测优势显著,检出限可达0.001%突变丰度。
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高耐受性,抗干扰能力强:对样本中抑制物、杂质、轻微核酸降解不敏感,可有效应对复杂样本体系,如血液、组织、粪便、环境样本、粗提核酸样本等,检测稳定性远超qPCR。
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高精准度与重复性:独立微反应体系规避了模板竞争、非特异性扩增干扰,批内、批间实验误差极小,CV值<5%,实验重复性、可靠性极高。
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无需Ct值依赖:终点法检测不受扩增效率影响,可精准区分微小浓度差异样本,尤其适合低浓度、差异小的样本定量分析。
服务内容Service Content
实验流程Experimental Procedure

送检要求
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- 样本类型
- 支持基因组DNA、质粒DNA、cDNA、RNA、病毒核酸、细胞上清、血液样本、组织核酸、环境核酸等各类纯化核酸样本;特殊原始样本(组织、细胞、菌体等)可提供核酸提取服务。
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- 样本质量标准
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- 核酸浓度:推荐浓度20–100 ng/μL,最低上机浓度不低于1 ng/μL;
- 核酸纯度:OD260/280值控制在1.8–2.0(DNA)、2.0–2.2(RNA),无蛋白、多糖、有机溶剂残留;
- 样本完整性:无明显降解、无反复冻融,RNA样本需严格无酶、无降解;
- 杂质要求:无高浓度盐离子、无抑制扩增杂质,避免影响微滴生成与扩增效率。
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- 样本包装与运输
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- 核酸样本采用无菌无酶离心管分装,密封严实,标注清晰样本编号、名称、靶点信息;
- DNA样本常温短途运输、低温冷藏长期运输;检测RNA水平基因样本全程干冰运输,避免降解;
- 所有样本独立包装,防止交叉污染,附带样本信息清单。
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