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RNA pulldown

提供RNA pull down检测技术服务,使用特异性二抗进行检测,能有效避免抗体重链对结果的信号干扰。并且金开瑞配套自己的质谱平台,能显著提升检测效果。

服务概述Service Overview
蛋白质与RNA的相互作用是许多细胞功能的核心,如蛋白质合成、mRNA组装、病毒复制、细胞发育调控等。使用体外转录法标记生物素RNA探针,然后与胞浆蛋白提取液孵育,形成RNA-蛋白质复合物。该复合物可与链霉亲和素标记的磁珠结合,从而与孵育液中的其他成分分离。复合物洗脱后,通过WB实验检测特定的RNA结合蛋白是否与RNA相互作用。若待检测目的蛋白明确,选择WB鉴定;若不明确,则可选择质谱鉴定。
服务优势Our Strengths
  • 高特异性
    富集与特定RNA序列相互作用的蛋白质,具有高度的特异性
  • 高灵敏度
    能够检测低丰度的RNA结合蛋白质,提供高灵敏度的检测能力
  • 广泛适用性
    可用于研究各种RNA结合蛋白质,包括转录因子、RNA结合蛋白和翻译调控因子等
  • 可定量分析
    通过引入外源标记或荧光标记的RNA探针,可以定量测量RNA与蛋白质的结合强度
  • 联合应用
    可与其他技术相结合,如质谱分析、蛋白质组学方法和转录组学方法等,进一步深入研究RNA-蛋白质相互作用的功能和调控网络
服务流程Service Process
1
接受订单及样品
2
RNA探针标记
3
与胞浆蛋白提取液孵育,形成RNA-蛋白质复合物
4
与磁珠结合,洗脱
5
WB检测或者质谱鉴定
6
结果交付
客户提供Sample Requirements
  • RNA序列或者RNA序列构建的质粒(种属)
  • 相同种属的细胞样品
最终交付Deliverables
  • 基因合成测序报告
  • 构建含目的基因的质粒、菌液,测序报告
  • 体外转录模版的sense&antisense引物、模版电泳图
  • RNA Pull down蛋白SDS-PAGE银染
  • 质谱鉴定报告
服务说明Service Content
服务名称

服务内容

交付内容及标准 服务周期(工作日)

RNA pull down-WB/qPCR (体外转录法)

pull down前检测

WB或qPCR检测1个猎物的实验前本底表达

25

扩增DNA模板

扩增sense和antisense DNA单链

RNA转录及⽣物素

标记

以DNA单链为模板,转录RNA后标记⽣物素并进⾏斑点杂交质控

RNA pull down富集

对照组和实验组各富集⼀次

pull down后检测

WB或qPCR检测1个猎物的实验后对照组、实验组、input组

RNA pull down-MS (体外转录法)

扩增DNA模板

扩增sense和antisense DNA单链

35

 

RNA转录及⽣物素

标记

以DNA单链为模板,转录RNA后标记⽣物素并进⾏斑点杂交质控

RNA pull down富集

对照组和实验组各富集⼀次

质谱鉴定

含银染及2组(实验组和对照组)质谱鉴定分析

RNA pull down-WB/qPCR    (探针法)

pulldown前检测

WB或qPCR检测1个猎物的实验前本底表达

29

诱饵本底表达检测及

探针设计合成

包含实验探针和对照探针设计合成

探针富集效果检测

实验探针和对照探针各1次

RNA pull down富集

实验探针和对照探针各1次

pulldown后检测

WB或qPCR检测1个猎物的实验后对照组、实验组、input组

39

RNA pull-down-MS

  (探针法)

 

诱饵本底表达检测及

探针设计合成

包含实验探针和对照探针设计合成

探针富集效果检测

实验探针和对照探针各1次

RNA pull down富集

实验探针和对照探针各1次

质谱鉴定

 

含银染及2组(实验组和对照组)质谱鉴定分析

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SUNYUAN BIO
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