服务概述Service Overview
荧光定量PCR技术基于常规PCR扩增原理，融合荧光信号实时检测与计算机数据分析技术。在PCR扩增反应体系中添加特异性荧光染料或荧光探针，随着PCR扩增循环的推进，扩增产物不断累积，荧光信号强度同步呈比例递增。仪器实时采集每一轮循环的荧光信号，自动绘制扩增曲线、溶解曲线，通过监测荧光信号的动态变化，精准识别扩增产物的数量变化规律。系统通过分析扩增曲线获取Ct值（循环阈值），结合标准曲线即可对样本中的初始模板核酸进行精准定量。目前主流检测方式分为两种，适配不同检测需求：
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- 染料法（SYBR Green I）
- 成本低、通用性强，适用于常规基因相对定量分析，可通过溶解曲线判断扩增产物特异性，有效区分特异性扩增与非特异性扩增。
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- 探针法（TaqMan等）
- 特异性极高、抗干扰能力强，可实现多通道多重检测，适用于病原体精准定量、低丰度基因检测、复杂样本检测等高精度场景。
服务内容Service Content
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服务类别详细描述适用场景
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1绝对定量通过标准品构建标准曲线，计算样本中靶基因的绝对拷贝数病毒载量检测、病原体定量、转基因拷贝数鉴定
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2相对定量采用 2−ΔΔCt2−ΔΔCt 法，计算实验组相较于对照组的基因表达变化倍数细胞/组织样本中的mRNA、miRNA、lncRNA表达谱分析
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3SNP/突变检测利用高分辨率熔解曲线或TaqMan探针法进行等位基因分型单核苷酸多态性分析、点突变检测
服务流程Service Process
01
样本采集
不同样本的采集方法和标准不同
02
核酸提取
RNA或DNA的提取
03
体系配制
根据试剂盒说明书配制qPCR反应体系
04
PCR扩增
上机，进行qPCR扩增和荧光检测
05
结果判读
根据说明书对结果进行判读并出具检测报告
样本要求Sample Requirements
| 样本类型 | 最低送样量 | 保存/运输条件 | 注意事项 |
| 组织 | ≥50mg | 液氮速冻后干冰运输 | 避免反复冻融，建议切分后送样。 |
| 细胞 | ≥1×10^6个 | 冻存细胞（干冰）或Trizol裂解液（冰袋） | 建议彻底去除培养基后加裂解液。 |
| 全血 | ≥500μL | EDTA抗凝管，4℃运输（24h内） | 不可使用肝素抗凝（抑制PCR反应）。 |
| RNA | ≥1μg（浓度≥100ng/μL） | -80℃保存，干冰运输 | 提供电泳图或生物分析仪RIN值（建议>7）。 |
| cDNA | ≥20μL | -20℃保存，冰袋运输 | 注明逆转录所用体系。 |
交付内容Deliverables
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- 实验报告（PDF）
- 包含样本信息、实验方法、仪器参数、原始Ct值表格
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- 数据图表
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• 扩增曲线图（对数/线性视图）
• 熔解曲线图（仅SYBR Green法）
• 标准曲线图（绝对定量）及扩增效率（E值，理想范围90%-110%）
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- 原始数据
- 仪器导出的RDML或Excel文件，供客户自主复核
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- 剩余样本
- 如客户需要，实验完成后可返还剩余核酸或cDNA
服务价格与周期Service Pricing & Turnaround Time
| 服务项目 | 计价单位 | 参考价格（元） | 实验周期 |
| RNA提取+质检 | 样 | 询价 | 1-2个工作日 |
| 逆转录（RT） | 样 | 询价 | 1个工作日 |
| 引物设计/合成（一对） | 基因 | 询价 | 2-3个工作日 |
| qPCR检测（含内参+目标基因） | 基因·样 | 询价 | 3-5个工作日 |
| 数据分析（基础） | 包含在内 | 免费 | 随实验完成 |
联系方式CONTACT US